货号名称规格
BDAA0165Polymer HRP Goat Anti Mouse IgG(H+L),Ready to Use3ml/10ml/100ml
BDAA0166Polymer HRP Goat Anti Rabbit IgG(H+L),Ready to Use3ml/10ml/100ml
BDAA0167Polymer HRP Goat Anti Mouse/Rabbit IgG(H+L),Ready to Use3ml/10ml/100ml
免疫组化（IHC）是利用抗体抗原相互结合的原理，使用带荧光的抗体检测组织切片中的蛋白质或是对抗原进行定位，通过有色酶底物显色检测或荧光染料荧光检测进行观察。
无论使用何种具体方法，该技术的第一步是一抗与其特异性靶标的选择性结合。然后，这种相互作用可以直接或间接地通过不同标记可视化，IHC二抗根据标记方法的不同可以分为以下五类：
间接法，二抗选择的是常规的酶标抗体，常用的标记酶是HRP，如【HRP-山羊抗兔IgG(H+L) #BF03008】
Figure 1. Indirect immunostaining method.
这类二抗的价格较为低廉，且为实验室常备基础试剂，较容易获取。
但是对于低丰度的蛋白，灵敏度低，结合效果较差。
PAP法，又称为过氧化物酶-抗过氧化物酶法。在孵育了二抗后，利用IgG的二价特性，再孵育一种能结合HRP的第三层报告抗体（PAP复合物（过氧化物酶--抗过氧化物酶抗体复合物））。
Figure 2. Two- (a) and three-step (b) bridge immunostaining methods.
PAP法相比于间接法，因为每个抗原位点定位了几个酶分子，因此提高了灵敏度，据报道，PAP法的灵敏度比两步间接法高出近100至1000倍。
但同时该方法也存在也提高了步骤繁琐、特异性抗体与PAP复合物的抗酶抗体必须为同源动物（同一种属动物）、多层检测抗体可能会增加与组织抗原非特异性相互作用的风险。
ABC（SABC）法，又称为亲和素-生物素-过氧化物酶复合物法。采用此方法的二抗上会标记生物素，加入的由亲和素以及标记了HRP的生物素组成ABC复合物与二抗结合，来进行信号的放大。
Figure 3.Avidin/streptavidin immunostaining method.
这种方法的优点是由于亲和素四聚体可以结合四种生物素复合物，可形成含有几种报告酶的更大的ABC复合物，导致抗原位点的信号强烈放大，从而能够成倍提高灵敏度。
但是，除了同样含有实验流程较长的缺点外，还需考虑，大的ABC结构可能难以在组织中有效扩散，内源性生物素的存在是背景的主要来源，因此需要内源生物素的封闭。此外，凭借其高等电点（pI=10），亲和素带正电，可以结合带负电的分子（例如核酸），它的碳水化合物部分可以与其他分子如凝集素相互作用，但这个问题可以通过下面的LSAB方法进行克服。
LSAB（SP）法，又称为生物素与链霉亲和素法。这种方法的主要区别在于它使用链霉亲和素而不是亲和素，使用HRP标记的链霉亲和素，与生物素化的二抗结合。
Figure 4. LAB/LSAB (a) and BRAB (b) immunostaining methods.
与亲和素相比，链霉亲和素没有会产生非特异性吸附的糖基，从而消除了与凝集素样分子的非特异性相互作用，并且它具有中性pI，从而降低了静电结合的风险。因此，LSAB方法减少了部分背景染色问题，其灵敏度据报道是ABC方法的十倍。
但与ABC法类似，LSAB方法在实验过程中同样需要进行内源生物素封闭，流程较为繁琐。
博奥龙Biodragon Polymer IHC 二抗，即克服了以上问题，同时又能满足高灵敏度的需求
Polymer法，不同于使用生物素-亲和素放大型号的方法，通过二抗-聚合物-酶的复合物与一抗结合，达到荧光定位的效果。
Figure 5. Polymer-based immunostaining method
基于聚合物共价连接的方式，利用与抗体和酶相连的聚合物链，大大增加了酶的数量，从而增加了组织上特定抗原附近的荧光强度。二抗上的聚合物都是性质较为稳定的物质，如葡聚糖，纤维素等，在天然条件下不易降解，酸碱耐受范围较广。
早期的Polymer抗体使用过程中，一些用户进行IHC实验时偶尔会出现检测灵敏度低的情况，这种情况可归因于大分子聚合物分子间的空间位阻，空间位阻阻碍了抗体与组织之间的结合效果。为了解决这个空间障碍的问题，已经开发了紧凑的聚合物复合体来减少空间位阻，使组织更容易被酶标物渗透。
此外，由于聚合物系统不需要生物素，亲和素的使用，因此避免了由内源性生物素表达引起的非特异性背景染色，相比ABC法和LSAB法，实验流程和周期也简单化了，缩短了。
间接法PAP法ABC法LSAB法Polymer法
优点操作简单，价格低灵敏度较高无需偶联灵敏度高灵敏度高灵敏度高，操作简单
缺点灵敏度低操作繁琐非特异性结合风险操作繁琐非特异性结合风险操作繁琐 非特异性结合风险价格相对较高
